Proyecto H2020 PHAGOVET: Una solución rentable para controlar Salmonella y Escherichia coli en la producción avícola

En este período, para lograr la producción de lotes comerciales del cóctel de fagos, se subcontrató a una nueva empresa productora de fagos que produjo diferentes lotes del producto PhagoVet utilizados en las diversas tareas realizadas durante este período. Para ello, fue necesario llevar a cabo y proporcionar a la empresa protocolos relacionados con la producción de lisados de fagos, la detección por PCR de fagos y la detección por PCR del ADN de las cepas de producción, entre otros, para garantizar que el producto cumpliera con los requisitos de la EFSA. En este sentido, en lo que respecta a la eficacia del producto biocida PhagoVet, se han probado tres lotes diferentes del cóctel PhagoVet en experimentos realizados siguiendo las regulaciones estándar para la evaluación de la actividad bactericida de desinfectantes y antisépticos químicos (biocidas) utilizados en el área veterinaria en superficies porosas y no porosas. Para ello, las regulaciones se adaptaron a la naturaleza específica de los bacteriófagos. 

Los resultados demostraron una reducción significativa de la concentración de Salmonella en superficies líquidas y no porosas bajo dos condiciones de suciedad diferentes, logrando la reducción log10 requerida por las normas correspondientes. Se observó un bajo efecto en superficies porosas. En cuanto a la "Evaluación del aditivo zootécnico para piensos Phagovet", se analizó la eficacia y la tolerancia del aditivo zootécnico para piensos PhagoVet frente a Salmonella mediante ensayos in vivo en granjas de pollos de engorde y gallinas ponedoras en dos ubicaciones geográficas diferentes de Europa. Se realizaron diez ensayos independientes con animales: dos de ellos de concepto, siete de eficacia y uno de seguridad, realizados de conformidad con el Reglamento (CE) 1831/2003. Se utilizaron dos serovares diferentes de Salmonella para la infección y se evaluaron diferentes condiciones de infección y administración del cóctel de fagos en el agua de bebida. En conjunto, los resultados obtenidos en algunos ensayos demostraron la eficacia del tratamiento con PhagoVet en pollos de engorde. Se observaron diferencias significativas en los recuentos de Salmonella en calzas al final de la prueba a los 35 días, lo que tuvo un impacto positivo en el rendimiento zootécnico. 

También se dedicó un esfuerzo considerable a la preparación de los expedientes para la evaluación del aditivo alimentario y el biocida Phagovet por parte de las agencias correspondientes. Para ello, se realizaron diversos estudios, incluyendo la caracterización y secuenciación de bacteriófagos y cepas productoras de Salmonella, así como otros relacionados con la seguridad del producto, incluyendo la seguridad del consumidor y del usuario. 

En cuanto a la evaluación del producto PhagoVet como biocida, se contactó con las autoridades competentes de casi 25 Estados miembros de la UE para que se encargaran de la evaluación de riesgos del biocida PHAGOVET. Sin embargo, la mayoría declinó la solicitud alegando exceso de trabajo y falta de experiencia en la evaluación de bacteriófagos. Continuaremos trabajando en la preparación del expediente de registro y en la búsqueda de una autoridad disponible para su revisión. El expediente del aditivo alimentario PhagoVet está en preparación y se espera enviarlo para su evaluación a corto plazo. Finalmente, se ha diseñado el plan final de comercialización y marketing, centrado en el desarrollo del aditivo alimentario zootécnico y biocida para el control de Salmonella. El proyecto también contempló el desarrollo de un aditivo alimentario para controlar la presencia de E. coli en la producción avícola.

Debido a limitaciones presupuestarias y regulatorias (después de que la vía de registro como aditivo alimentario para el producto PHAGOVET de E. coli no fuera adecuada ni aceptada por las autoridades de la UE, debiendo registrarse como producto veterinario), el trabajo se centró en los paquetes de trabajo 1, 2 y 3, con el objetivo de recopilar conocimientos y datos para desarrollar un prototipo de producto y sustentar un posible registro de la solución de fagos de E. coli como producto veterinario en el futuro. 

Se aislaron y caracterizaron funcionalmente morfológicamente un total de 44 fagos de E. coli, de los cuales 32 resultaron ser lisogénicos o poseer genes de toxinas o antibiorresistencia, lo que los hace no aptos para terapia. Los 12 restantes serían adecuados para integrar una formulación de cóctel. Sin embargo, los espectros líticos de estos fagos eran muy estrechos para cubrir la diversidad genética de E. coli aislada en el campo, lo que dificultaba la producción de una formulación de cóctel fija que funcionara como una solución de amplio espectro. En el caso del tratamiento de E. coli, descubrimos que las formulaciones personalizadas diseñadas para matar las bacterias que realmente infectan a los animales serían la mejor opción de tratamiento.