Projet H2020 Paragone : PARAGONE : Vaccins contre les parasites animaux

La recherche a conduit au développement des vaccins et des outils immunologiques mentionnés ci-dessus. Ces activités ont été soutenues par des objectifs de démonstration menés par des partenaires commerciaux. Les partenaires académiques ont rempli leur obligation de publier leurs résultats et ont mis à jour le site Web du projet. Les scientifiques en début de carrière ont eu l'opportunité de participer à des visites interlaboratoires et à des ateliers (séquençage de nouvelle génération, outils immunologiques, vaccinologie vétérinaire). De nombreuses activités de sensibilisation ont permis au projet d’atteindre son potentiel d’impact ; Des symposiums en personne avec les parties prenantes et une enquête internationale en ligne ont révélé les perspectives d’avenir des vaccins antiparasitaires.

Les vaccins ont commencé à différents stades de développement ; Du plus avancé au moins avancé, il s’agissait de vaccins contre T. circumcincta, O. ostertagi, C. oncophora, F. hepatica, P. ovis et l’acarien rouge de la volaille. Des études sur des formulations de vaccins conçues pour favoriser des réponses protectrices ont été menées en lien avec des essais testant des combinaisons d’antigènes. Ces travaux ont été liés à la définition de réponses antiparasitaires protectrices afin que les vaccins puissent être conçus pour être efficaces dans toutes les populations. Pour O. ostertagi et C. oncophora, des études et des tests immunologiques ont démontré que la conformation de l'antigène est essentielle pour induire une protection à l'aide d'antigènes ASP. Il a été démontré qu'un ASP natif de C. oncophora offre une protection croisée aux bovins contre un autre isolat et d'autres Cooperia spp. mais n’a pas protégé les moutons contre C. curticei. La formulation d'un Ostertagia ASP recombinant avec la nouvelle formulation d'adjuvant SME XStalbio avec MAMP a modulé les réponses à un phénotype souhaité, mais n'a pas induit de protection. Un essai sur le terrain avec de l'ASP indigène d'Ostertagia, qui avait induit une immunité dans des essais en enclos, n'a pas généré de protection contre la provocation par l'herbe. Une étude a testé un ASP recombinant, purifié au thiol de la même manière que l’ASP natif protecteur, mais cela n’a pas produit de vaccin protecteur.

Les travaux sur T. circumcincta visaient à simplifier un vaccin recombinant qui s’est avéré induire une protection. Ici, 8 antigènes ont été co-exprimés avec succès dans 3 systèmes. La version co-exprimée n’a pas induit d’immunité chez les agneaux. La formulation adjuvante de XStalbio avec MAMP a été testée pour déterminer si les réponses pouvaient être améliorées par co-administration. L’incorporation a conservé l’antigénicité mais n’a pas amélioré les réponses souhaitées. Des essais en enclos sur des races canariennes présentant une résistance différente aux vers ont montré que chez les moutons « résistants » de 6 mois, la résistance augmentait avec la vaccination. Chez les agneaux « sensibles », la vaccination a eu un effet négatif sur le développement des vers. Un effet similaire a été observé chez des moutons « résistants » âgés de 3 mois. Les séquences codant pour l'antigène chez les vers de différentes régions ont montré une faible diversité dans les protéines 7/8. Un prototype à 2 protéines a induit une protection similaire à celle du prototype à 8 protéines.

Ce vaccin à 2 protéines a été retesté dans une étude qui a examiné l’effet de la dose ; Bien que les individus vaccinés aient présenté des paramètres parasitologiques inférieurs à ceux des témoins, les différences n’étaient pas significatives. Une modélisation mathématique, utilisant des données antérieures sur le vaccin à 8 protéines, a montré que les niveaux d’efficacité atteints précédemment pourraient avoir un effet substantiel sur la contamination ultérieure si le vaccin était administré aux moutons et aux agneaux. Il a déjà été démontré que les antigènes recombinants de F. hepatica offrent une protection variable ; Les partenaires ont testé ces combinaisons pour déterminer si cela générerait une protection cohérente. Une protection significative a été observée dans un essai sur des moutons utilisant 4 antigènes + montanide ; Ce n’était pas répétable. Deux essais sur des bovins utilisant les 4 antigènes ont échoué. Les séquences antigéniques des vers de différentes régions ont montré une faible diversité dans tous les cas sauf un. L’incorporation de MAMP dans la formulation d’adjuvant XStalbio a été testée pour déterminer si les réponses pouvaient être améliorées par la co-administration. L'antigénicité a été maintenue, en particulier avec MAMP. Les réponses dépendaient de l’adjuvant, mais aucune protection n’a été obtenue lorsque les moutons ont été exposés. Des antigènes supplémentaires ont été testés, mais ils n’ont pas conféré de protection aux moutons.

Les travaux sur les corrélats de protection ont montré un rôle pour l’IgG2. L’analyse des épitopes a indiqué une reconnaissance sélective de la cathepsine L chez les bovins protégés. Une analyse d’ARN à grande échelle a révélé que les voies d’évasion immunitaire étaient considérablement altérées dans l’infection par la douve, et un essai dans un enclos à moutons a montré une immunomodulation dans les premiers stades de l’infection. Ces résultats d’immunomodulation seront désormais utilisés pour éclairer le développement ultérieur du vaccin contre F. hepatica. Les travaux sur un prototype bovin pour P. ovis comprenaient un essai avec des recombinants qui protégeaient auparavant les moutons. Bien que des différences dans la taille des lésions aient été initialement observées, aucune différence significative n’a été observée dans l’ensemble.

Les études sur l’ARN ont éclairé les mécanismes immunitaires. Les systèmes d'administration d'antigènes (montanid, ADN et Eimeria transgénique) ont été comparés pour un vaccin à base de cathepsine contre l'acarien rouge aviaire. L'ADN et Eimeria ont montré des réponses anticorps négligeables, mais la combinaison antigène+montanide a produit des réponses prolongées. Les poules ont été vaccinées avec la cathepsine + montanide et un effet a été observé sur les acariens qui se nourrissaient du sang des oiseaux vaccinés. PARAGONE a généré des réseaux de cytokines ovines indispensables. Parallèlement aux profils de produits cibles et aux revues techniques de chaque vaccin, un plan de commercialisation de ces outils a été élaboré en collaboration avec la PME Immunotools.