Projecte H2020 Paragon: PARAGONY: vacunes contra paràsits animals

La investigació va impulsar el desenvolupament de vacunes i eines immunològiques, esmentades inicialment. Aquestes activitats van comptar amb el suport dels objectius de demostració liderats per socis comercials. Els socis acadèmics van complir la seva obligació de publicar les seves troballes i van actualitzar el lloc web del projecte. Els científics als seus inicis professionals van tenir l'oportunitat de participar en visites i tallers interlaboratoris (Seqüenciació de Pròxima Generació, Eines Immunològiques, Vaccinologia Veterinària). Nombroses activitats de divulgació van assegurar que el projecte arribés al potencial d'impacte; simposis presencials amb les parts interessades i una enquesta internacional en línia van donar a conèixer les perspectives futures de les vacunes antiparasitàries.

Les vacunes van començar en diverses etapes en el camí del desenvolupament; des de la més avançada fins a la menys avançada, aquestes van ser vacunes contra T. circumcincta, O. ostertagi, C. oncophora, F. hepatica, P. ovis, àcar vermell de les aus de corral. Vinculat a assajos que van provar combinacions d'antígens, van ser estudis sobre la formulació de vacunes dissenyades per promoure respostes protectores. Aquest treball estava vinculat a la definició de respostes protectores antiparasitàries perquè les vacunes es poguessin dissenyar per ser efectives a totes les poblacions. Per O. ostertagi i C. oncophora, estudis i assaigs immunològics van demostrar que la conformació de l'antigen és clau en la inducció de protecció usant antígens ASP. Es va demostrar que un ASP nadiu de C. oncophora protegia de manera creuada el bestiar contra un altre aïllat i altres Cooperia spp. però no protegia les ovelles contra C. curticei. La formulació d'un ASP recombinant d'Ostertagia amb la nova formulació adjuvant de SME XStalbio amb MAMP va modular les respostes a un fenotip desitjat, però no va induir protecció. Un assaig de camp amb ASP nativa d'Ostertagia, que havia induït immunitat en assaigs a corrals, no va generar protecció contra el desafiament de les pastures. Un estudi va provar un ASP recombinant, purificat amb tiol de la mateixa manera que l'ASP natiu protector, però això no va produir una vacuna protectora.

El treball a T. circumcincta va tenir com a objectiu simplificar una vacuna recombinant que va demostrar induir protecció. Aquí, 8 antígens es van coexpressar amb èxit en 3 sistemes. La versió coexpressada no va induir immunitat en bens. La formulació adjuvant de XStalbio amb MAMP es va provar per examinar si les respostes es podrien millorar mitjançant la coadministració. La incorporació va retenir l'antigenicitat però no va millorar les respostes desitjades. Els assaigs en corrals en races canàries que van mostrar diferent resistència als cucs van mostrar que en ovelles "resistents" de 6 mesos, la resistència es va incrementar amb la vacunació. En bens "susceptibles", la vacunació va tenir un efecte negatiu en el desenvolupament de cucs. Es va observar un efecte semblant en ovelles "resistents" de 3 mesos. Les seqüències que codifiquen antígens en cucs de diferents regions van mostrar baixa diversitat en 7/8 proteïnes. Un prototip de 2 proteïnes va induir una protecció similar al rang del prototip de 8 proteïnes.

Aquesta vacuna de 2 proteïnes es va tornar a tastar en un estudi que va analitzar l'efecte de la dosi; encara que els vacunats van tenir paràmetres parasitològics més baixos que els controls, les diferències no van ser significatives. El modelatge matemàtic, utilitzant dades prèvies sobre la vacuna de 8 proteïnes, va mostrar que els nivells d'eficàcia assolits prèviament podrien tenir un efecte substancial en la contaminació posterior si la vacuna s'administrava a ovelles i bens. Anteriorment s'havia demostrat que els antígens recombinants de F. hepatica brinden una protecció variable; els socis van provar aquests combinats per examinar si això generaria una protecció consistent. Es va observar una protecció significativa en un assaig amb ovelles utilitzant 4 antígens + montanida; això no va ser repetible. Dos assaigs amb bestiar boví utilitzant els 4 antígens no van tenir èxit. Les seqüències d'antígens en cucs de diferents regions van mostrar baixa diversitat en tots menys un. Es va mantenir l'antigenicitat, particularment amb MAMP. Les respostes van ser dependents de l'adjuvant, però no es va obtenir protecció quan es van desafiar les ovelles. Es van provar antígens addicionals, però aquests no van brindar protecció a les ovelles.

El treball sobre correlats de protecció va mostrar un paper per a IgG2. L'anàlisi d'epítops va indicar el reconeixement selectiu de la catepsina L al bestiar protegit. L'anàlisi d'ARN a gran escala va revelar que les vies d'evasió immunitària van canviar significativament a la infecció per dueles i un assaig en corrals d'ovelles va mostrar immunomodulació a les primeres etapes de la infecció. Aquests resultats sobre immunomodulació s'utilitzaran ara per informar el desenvolupament posterior de la vacuna contra F. hepatica. El treball sobre un prototip boví per a P. ovis va abastar un assaig amb recombinants que van protegir prèviament les ovelles. Tot i que inicialment es van observar diferències en la mida de la lesió, no es va observar cap diferència significativa en general.

Els estudis d'ARN van informar els mecanismes immunitaris. Es van comparar els sistemes d'administració d'antígens (muntanya, ADN i Eimèria transgènica) per a una vacuna de catepsina contra l'àcar vermell de les aus. L'ADN i l'Eimèria van mostrar una resposta d'anticossos insignificant, però la combinació antigen+muntanya va produir respostes perllongades. Es van vacunar gallines amb catepsina+muntanada i es va observar un efecte als àcars que es van alimentar de sang d'aus vacunades. PARAGONE va generar matrius de citocines ovines molt necessàries. Juntament amb els perfils de producte objectiu i les revisions tècniques de cada vacuna, es va elaborar un pla de comercialització per a aquestes eines en col·laboració amb la pime Immunotools.