Proyecto H2020 Paragone: PARAGONE: vacunas contra parásitos animales

La investigación impulsó el desarrollo de vacunas y herramientas inmunológicas, mencionadas inicialmente. Estas actividades contaron con el apoyo de objetivos de demostración liderados por socios comerciales. Los socios académicos cumplieron con su obligación de publicar sus hallazgos y actualizaron el sitio web del proyecto. Los científicos en sus inicios profesionales tuvieron la oportunidad de participar en visitas y talleres interlaboratorios (Secuenciación de Próxima Generación, Herramientas Inmunológicas, Vaccinología Veterinaria). Numerosas actividades de divulgación aseguraron que el proyecto alcanzara su potencial de impacto; simposios presenciales con las partes interesadas y una encuesta internacional en línea dieron a conocer las perspectivas futuras de las vacunas antiparasitarias. Las vacunas comenzaron en varias etapas en el camino del desarrollo; desde la más avanzada hasta la menos avanzada, estas fueron vacunas contra T. circumcincta, O. ostertagi, C. oncophora, F. hepatica, P. ovis, ácaro rojo de las aves de corral. Vinculado a ensayos que probaron combinaciones de antígenos, fueron estudios sobre la formulación de vacunas diseñadas para promover respuestas protectoras. Este trabajo estaba vinculado a la definición de respuestas protectoras antiparasitarias para que las vacunas pudieran diseñarse para ser efectivas en todas las poblaciones. Para O. ostertagi y C. oncophora, estudios y ensayos inmunológicos demostraron que la conformación del antígeno es clave en la inducción de protección usando antígenos ASP. Se demostró que un ASP nativo de C. oncophora protegía de forma cruzada al ganado contra otro aislado y otras Cooperia spp. pero no protegía a las ovejas contra C. curticei. La formulación de un ASP recombinante de Ostertagia con la novedosa formulación adyuvante de SME XStalbio con MAMP moduló las respuestas a un fenotipo deseado, pero no indujo protección. Un ensayo de campo con ASP nativa de Ostertagia, que había inducido inmunidad en ensayos en corrales, no generó protección contra el desafío de los pastos. Un estudio probó un ASP recombinante, purificado con tiol de la misma manera que el ASP nativo protector, pero esto no produjo una vacuna protectora. El trabajo en T. circumcincta tuvo como objetivo simplificar una vacuna recombinante que demostró inducir protección. Aquí, 8 antígenos se coexpresaron con éxito en 3 sistemas. La versión coexpresada no indujo inmunidad en corderos. La formulación adyuvante de XStalbio con MAMP se probó para examinar si las respuestas podrían mejorarse mediante la coadministración. La incorporación retuvo la antigenicidad pero no mejoró las respuestas deseadas. Los ensayos en corrales en razas canarias que mostraron diferente resistencia a los gusanos mostraron que en ovejas "resistentes" de 6 meses de edad, la resistencia se incrementó con la vacunación. En corderos "susceptibles", la vacunación tuvo un efecto negativo en el desarrollo de gusanos. Se observó un efecto similar en ovejas "resistentes" de 3 meses. Las secuencias que codifican antígenos en gusanos de diferentes regiones mostraron baja diversidad en 7/8 proteínas. Un prototipo de 2 proteínas indujo una protección similar al rango del prototipo de 8 proteínas. Esta vacuna de 2 proteínas se volvió a probar en un estudio que analizó el efecto de la dosis; aunque los vacunados tuvieron parámetros parasitológicos más bajos que los controles, las diferencias no fueron significativas. El modelado matemático, utilizando datos previos sobre la vacuna de 8 proteínas, mostró que los niveles de eficacia alcanzados previamente podrían tener un efecto sustancial en la contaminación posterior si la vacuna se administraba a ovejas y corderos. Anteriormente se había demostrado que los antígenos recombinantes de F. hepatica brindan una protección variable; los socios probaron estos combinados para examinar si esto generaría una protección consistente. Se observó una protección significativa en un ensayo con ovejas utilizando 4 antígenos + montanida; esto no fue repetible. Dos ensayos con ganado vacuno utilizando los 4 antígenos no tuvieron éxito. Las secuencias de antígenos en gusanos de diferentes regiones mostraron baja diversidad en todos menos uno.Se probó la incorporación de MAMP en la formulación adyuvante de XStalbio para examinar si las respuestas podían mejorarse mediante la administración conjunta. Se mantuvo la antigenicidad, particularmente con MAMP. Las respuestas fueron dependientes del adyuvante, pero no se obtuvo protección cuando se desafiaron las ovejas. Se probaron antígenos adicionales, pero estos no brindaron protección en las ovejas. El trabajo sobre correlatos de protección mostró un papel para IgG2. El análisis de epítopos indicó el reconocimiento selectivo de la catepsina L en el ganado protegido. El análisis de ARN a gran escala reveló que las vías de evasión inmunitaria cambiaron significativamente en la infección por duelas y un ensayo en corrales de ovejas mostró inmunomodulación en las primeras etapas de la infección. Estos resultados sobre inmunomodulación se utilizarán ahora para informar el desarrollo posterior de la vacuna contra F. hepatica. El trabajo sobre un prototipo bovino para P. ovis abarcó un ensayo con recombinantes que protegieron previamente a las ovejas. Aunque inicialmente se observaron diferencias en el tamaño de la lesión, no se observó ninguna diferencia significativa en general. Los estudios de ARN informaron los mecanismos inmunitarios. Se compararon los sistemas de administración de antígenos (montanida, ADN y Eimeria transgénica) para una vacuna de catepsina contra el ácaro rojo de las aves. El ADN y la Eimeria mostraron una respuesta de anticuerpos insignificante, pero la combinación antígeno+montanida produjo respuestas prolongadas. Se vacunaron gallinas con catepsina+montanida y se observó un efecto en los ácaros que se alimentaron de sangre de aves vacunadas. PARAGONE generó matrices de citocinas ovinas muy necesarias. Junto con los perfiles de producto objetivo y las revisiones técnicas de cada vacuna, se elaboró ??un plan de comercialización para estas herramientas en colaboración con la pyme Immunotools.