H2020 Paragone Proiektua: PARAGONE: Animalien parasitoen aurkako txertoak
- Mota Proiektua
- Egoera Bete
- Exekuzioa 2015 -2019
- Esleitutako Aurrekontua 8.998.559,75 €
- Eremua Europeo
- Finantza-iturri nagusia H2020
- Proiektuaren webgunea Proyecto Paragone
Hausnarkari eta hegaztietan helmintoek eta infekzio ektoparasitoek eragin handia dute ezinbesteko elikagai-iturri horien eraginkortasun biologikoan. Parasitoen aurkako sendagaien erabilera indiskriminatuak botiken erresistentzia sortu du mundu osoan. Parasitoen aurkako sendagaien eskasiaren alternatiba nagusia txertoak dira. PARAGONE proiektuak EBk eta finantzatutako beste proiektu batzuen aurkikuntzak baliatuko ditu parasitoen txertoen garapenari buruz, etorkizun handiko hainbat prototipoen merkaturatzean aurrera egiteko. Europa, Txina, Uruguaiko, ETE eta farmazia-industriako bazkideek Fasciola hepatica, Cooperia spp., Ostertagia ostertagi, Teladorsagia circumcincta eta Haemonchus contortus hausnarkarietan helmintoen aurkako prototipoak zuzenean sustatuko dituzte, bai eta Pevissorinsorinantse edo Devissorinantse akaro ektoparasitoen eta Devissorinantse (Devissorinsorinants) eta galtzaileen aurkako prototipoak. (hegaztiak).
Prototipo batzuen eraginkortasuna maximizatzeko adjuvante edo entrega-sistema berriak erabiliko dira. Horrez gain, immunologia-azterketak aurretik problematikoak izan diren patogenoetan zentratuko dira, askotan txertoak funtziona dezan gainditu behar diren molekula immunosupresoreak askatzen dituztelako edo txerto birkonbinatzaileek prototipo autoktonoekin ikusitako babesa lortu ez dutelako. Punta-puntako teknologiak erabiliko dira ostalariaren/parasitoaren elkarrekintzak galdetzeko, immunitatea hobetuko duten entrega-sistemei jakinarazteko erabil daitezkeen babes-sinadura gakoak definitzeko, eta ikerketa aurreragoek egungo txerto-hautagaietan polimorfismoa definituko dute, eratorritako prototipoak eskala geografiko guztietan helbururako egokiak direla ziurtatzeko.
Horren gakoa da zientzialariek farmazia-industriarekin eta beste eragile batzuekin (nekazariak, albaitariak, erregulatzaileak) konpromisoa hartzea, hainbat dibulgazio-jardueraren bidez, txertoak eremuan hobekien nola inplementa daitezkeen iritziak biltzeko erabiliko direnak. Emaitza, gutxienez, bi prototipo izango dira, farmazia-industriak, gobernuak edo agentzia filantropikoak hartzeko puntura iritsi direnak, eta aztertutako prototipo guztien merkaturatzeko bide argia.
Ikerketak goian aipatutako txertoak eta tresna immunologikoak garatzea ekarri zuen. Jarduera hauek bazkide komertzialek zuzendutako erakustaldi-helburuek lagundu zituzten. Bazkide akademikoek euren aurkikuntzak argitaratzeko betebeharra bete zuten eta proiektuaren webgunea eguneratu zuten. Karrera hasierako zientzialariek laborategien arteko bisitetan eta tailerretan parte hartzeko aukera izan zuten (Hurrengo belaunaldiko sekuentziazioa, tresna immunologikoak, albaitariaren txertoa). Dibulgazio-jarduera ugarik bermatu zuten proiektuak bere eragin-potentziala lortu zuela; Pertsona interesdunen jardunaldiek eta nazioarteko online inkesta batek parasitoen aurkako txertoen etorkizuneko aukerak agerian utzi zituzten.
Txertoak garapen bidean hainbat fasetan hasi ziren; Aurreratuenetik gutxien aurreratuenera, T. circumcincta, O. ostertagi, C. oncophora, F. hepatica, P. ovis eta hegazti-akaro gorriaren aurkako txertoak izan ziren. Antigenoen konbinazioak probatzeko entseguekin lotuta, babes-erantzunak sustatzeko diseinatutako txerto-formulazioei buruzko ikerketak zeuden. Lan hau babes parasitoen aurkako erantzunen definizioarekin lotuta zegoen, txertoak populazio guztietan eraginkorrak izateko diseinatu ahal izateko. O. ostertagi eta C. oncophorarentzat, azterketa eta saiakuntza immunologikoek frogatu zuten antigenoaren konformazioa funtsezkoa dela ASP antigenoak erabiliz babesa eragiteko. C. oncophoraren jatorrizko ASP batek abereak beste isolatu batzuen eta beste Cooperia spp. baina ez zituen ardiak C. curticei-ren aurka babesten. Ostertagia ASP birkonbinatzaile baten formulazioa XStalbio SME adjuvant formulazio berriarekin MAMP modulatutako erantzunekin nahi den fenotipo bati, baina ez zuen babesik eragin. Ostertagiako ASP natiboarekin egindako landa-saiakuntzak, pen-saioetan immunitatea eragin zuenak, ez zuen belar-erronkearen aurkako babesik sortu. Azterketa batek ASP birkonbinatzaile bat probatu zuen, tiol bidez araztutako ASP natibo babesgarriaren modu berean, baina honek ez zuen txerto babesik sortu.
T. circumcincta-n egindako lanak babesa eragiten zuela frogatu zen txerto birkonbinatzailea sinplifikatzea zuen helburu. Hemen, 8 antigeno arrakastaz batera adierazi ziren 3 sistemetan. Adierazitako bertsioak ez zuen arkumeengan immunitatea eragin. XStalbio-ren formulazio osagarria MAMParekin probatu zen ea erantzunak elkarrekin administrazioarekin hobetu daitezkeen aztertzeko. Inkorporazioa antigenikotasuna mantendu zuen, baina ez zituen nahi diren erantzunak hobetu. Kanariar arrazetako pen-saioek zizareekiko erresistentzia desberdina erakutsi zuten 6 hilabeteko ardi "erresistenteetan" erresistentzia handitu egin zela txertaketarekin. Arkume "susceptible"etan, txertoak eragin negatiboa izan zuen zizareen garapenean. Antzeko efektua ikusi zen 3 hilabeteko ardi "erresistenteetan". Eskualde ezberdinetako zizareen antigeno-kodetze-sekuentziak aniztasun txikia erakutsi zuten 7/8 proteinetan. 2 proteina-prototipo batek 8 proteina-prototipoaren antzeko babesa eragin zuen.
2 proteinako txerto hau dosiaren eragina aztertu zuen ikerketa batean berriro probatu zen; Txertoa hartutako gizabanakoek kontrolak baino parasito-parametro baxuagoak zituzten arren, aldeak ez ziren esanguratsuak izan. Eredu matematikoak, 8 proteinako txertoari buruzko aurreko datuak erabiliz, aldez aurretik lortutako eraginkortasun-mailek eragin handia izan dezaketela ondorengo kutsaduran txertoa ardiei eta arkumeei emanez gero. Aurretik F. hepatica antigeno birkonbinatzaileek babes aldakorra ematen dutela frogatu da; Bazkideek konbinazio hauek probatu zituzten horrek babes koherentea sortuko ote zuen aztertzeko. Babes garrantzitsua ikusi zen ardi-saiakuntza batean 4 antigeno + montanido erabiliz; Hau ez zen errepikagarria. 4 antigenoak erabiliz behiekin egindako bi entsegu ez zuten arrakastarik izan. Eskualde ezberdinetako zizareen antigeno-sekuentziak aniztasun txikia erakutsi zuten guztietan, batean izan ezik. XStalbio adjuvant formulazioan MAMPak txertatzea probatu zen, erantzunak koadministrazioaren bidez hobetu daitezkeen aztertzeko. Antigenikotasuna mantendu zen, bereziki MAMParekin. Erantzunak adjuvanteen menpekoak ziren, baina ez zen babesik lortu ardiak desafiatzen zirenean. Antigeno gehigarriak probatu ziren, baina horiek ez zuten babesik ematen ardietan.
Babesaren korrelazioei buruzko lanek IgG2ren zeregina erakutsi zuten. Epitopoen azterketak L katepsinaren aitorpen selektiboa adierazi zuen babestutako behietan. Eskala handiko RNA analisiak agerian utzi zuen ihesbide immunologikoak nabarmen aldatu zirela fluke infekzioan, eta ardi lurtegiko proba batek infekzioaren hasierako faseetan immunomodulazioa erakutsi zuen. Inmunomodulazio-emaitza hauek F. hepatica txertoaren garapenaren berri emateko erabiliko dira orain. P. ovis-entzako behi-prototipo batean egindako lanek aurretik ardiak babesten zituzten errekonbinatzaileekin egindako entsegu bat izan zuten. Hasieran lesioen tamainan desberdintasunak ikusi baziren ere, ez zen desberdintasun esanguratsurik ikusi orokorrean.
RNA azterketek immunitate-mekanismoen berri eman zuten. Antigenoak emateko sistemak (montanidoa, DNA eta Eimeria transgenikoa) hegazti akaro gorriaren aurkako katepsinaren txerto baterako alderatu ziren. DNAk eta Eimeriak antigorputzen erantzun arbuiagarriak erakutsi zituzten, baina antigenoa+montanidoa konbinazioak erantzun luzeak sortu zituen. Oiloei katepsina+montanidearekin txertatu eta txertoa hartutako hegaztien odolaz elikatzen ziren akaroetan eragina ikusi zen. PARAGONE-k oso beharrezkoak diren ardi-zitokinen multzoak sortu zituen. Helburuko produktuen profilekin eta txerto bakoitzaren berrikuspen teknikoekin batera, tresna horien merkaturatze-plan bat garatu zen ETE Immunotools-ekin elkarlanean.
EBk finantzatutako Horizon 2020 PARAGONE proiektuak zelula anitzeko parasitoei aurre egin zien, abeltzaintzako patogeno garrantzitsuak. Hausnarkarien eta hegaztien ekoizpenean nabarmen eragiten dute, batez ere sistema intentsiboetan.
Gaur egun, kontrola parasito eraginkorren kopurua murriztearen araberakoa da, eta helburu parasitoen artean botiken erresistentzia kontrol iraunkorraren mehatxua da. PARAGONEk tresnak (txertoak eta immunitatea kontrolatzeko baliabideak) eta ezagutzak sortu zituen epe luzerako kontrolerako irtenbideak emateko. Proiektuak hasierako karrerako zientzialari ugari ere prestatu zituen, diziplinarteko ikuspegietan adituak, komunitate zientifiko globala kontrolatzeko zailak diren patogeno horiei aurre egiteko prest dagoela ziurtatzeko proiektua amaitutakoan.
Bazkide akademikoek animalien osasunaren industriako bazkideekin loturak sendotu zituzten, mundu osoan zehar hautatutako parasitoentzako txertoak bideratzeko garapen-programak ezartzeko: Fasciola hepatica, Ostertagia ostertagi, Cooperia oncophora, Teladorsagia circumcincta, Psoroptes ovis eta Dermanyssus gallinae. Organismo konplexu horien aurkako txerto eraginkorrak garatzea erronka handia da.
Proiektuak aurrerapen handiak egin zituen helburu honetarako parasitoen biologiaren eta ostalari-parasitoaren arteko elkarreraginaren ezagutza lortuz eta aprobetxatuz. Txerto-hautagai nagusiak/berriak probatu ziren, erantzunaren aldakortasunari aurre egiteko ikerketekin batera, etorkizuneko ikerketetan emango duten babes-faktoreei buruzko informazioa emanez. Lorpen horiek prestakuntza, dibulgazio eta komunikazio jarduera sendoek lagundu zituzten.
Hausnarkarien eta hegaztien helmintoek eta ektoparasitoek eragin handia dute elikagai-iturri ezinbesteko horien eraginkortasun biologikoan. Parasitoen aurkako erabilera bereizirik gabe botiken erresistentzia eragin du mundu osoan.
Parasitoen aurkako sendagaien hornidura murrizten duen alternatiba nagusia txertoak dira. Kasu honetan, PARAGONE proiektuak EBk finantzatutako aurreko proiektuen eta parasitoen txertoen garapenari buruzko beste proiektu batzuen emaitzak baliatuko ditu, prototipo itxaropentsu batzuk merkaturatzera ekartzeko. Europa, Txina, Uruguaiko, ETE eta farmazia-enpresek zuzenean garatuko dituzte Fasciola hepatica, Cooperia spp., Ostertagia ostertagi, Teladorsagia circumcincta eta Haemonchus contortus helminto hausnarkarien aurkako prototipoak eta Psoroptes (Psoroptes) eta gallinarmaninantsssus ovisultry (Psoroptes) eta ( gallinarmaninantsssus ) eta ( gallinarmanantssus ) akaro ektoparasitoen aurkako prototipoak. Prototipo batzuen eraginkortasuna maximizatzeko adjuvante edo entrega sistema berriak erabiliko dituzte.
Horrez gain, immunologia-azterketak aurretik problematikoak izan diren patogenoetan zentratuko dira, sarritan txertoak funtziona dezan gainditu behar diren molekula immunosupresoreak askatzen dituztelako edo txerto birkonbinatzaileek prototipo autoktonoekin ikusitako babesa lortu ez dutelako. Punta-puntako teknologiak erabiliko dira ostalariaren/parasitoaren elkarrekintzak galdetzeko, immunitatea hobetuko duten entrega-sistemei informatzeko erabil daitezkeen babes-sinadura gakoak definitzeko, eta ikerketa gehiagotan polimorfismoa definituko dute egungo txerto-hautagaietan, eratorritako prototipoak eskala geografiko guztietan helbururako egokiak direla ziurtatzeko.
Ezinbestekoa da zientzialariak farmazia-enpresekin eta beste eragile batzuekin (nekazariak, albaitariak, erregulatzaileak) parte hartzea, dibulgazio-jarduera ugariren bidez, txertoak eremuan hobekien nola inplementa daitezkeen iritziak biltzeko erabiliko direnak. Emaitza, gutxienez bi prototipo izango dira farmazia, gobernu edo agentzia filantropikoek hartzeko prest, eta aztertutako prototipo guztien merkaturatzeko bide argia.
Abere-parasitoek botiken erresistentzia garatzen duten heinean mundu osoan, EBk finantzatutako zientzialariak txerto berriak lantzen ari dira eta txertoak emateko sistemak hobetzen ari dira ekonomikoki garrantzitsuak diren parasitoen aurka. Txertoak gaixotasunak kontrolatzeko botiken alternatiba seguruagoa eta ingurumena errespetatzen duen alternatiba bat dira, ez baitute hondakinik uzten edo parasitoen erresistentzia sortzen. Hala ere, zelula anitzeko parasitoak organismo konplexuak dira birusekin eta bakterioekin alderatuta, beraz, ez da erraza haien aurkako txertoak garatzea. "Parasitoak bere ostalariekin eboluzionatu dute milioika urtez eta mota guztietako trikimailuak erabili dituzte beste animaliengan edo beste animaliengan bizitzeko, sistema immunologikoak detektatu gabe, detektatzeko zailduz", dio Al Nisbet, EBk finantzatutako Paragone proiektuko zientzialari nagusiak eta proiektua koordinatu zuen Moredun Ikerketa Institutuko Erresuma Batuko txertoen buruak.
Paragone taldeak lehendik zeuden sei txerto-prototiporekin lan egin zuen, abeltzaintzako parasito nagusienen aurka, ardiak, behiak eta hegaztiak barne. Ardien zizarearen txertoa sinplifikatzea Taldeak aurrera egin zuen ardietako urdaileko zizare marroiaren ( Teladorsagia circumcincta ) aurkako txerto batekin, zortzi osagai ezberdin dituen txerto prototipo batetik hasita. "Proteina birkonbinatzaileetatik sei bakterioetan eta bi legamian ekoitzi ziren, eta gero elkarrekin formulatu ziren txertoa sortzeko; beraz, prototipo eraginkorra zen arren, bere ekoizpen komertziala konplexua eta garestia zen", dio Nisbet-ek. Parasitoaren aurkako babeserako proteina garrantzitsuenak identifikatu ziren. "Proiektuaren amaieran, bi osagai besterik ez dituen txertoa probatu eta eredu matematiko bat sortzeko gai izan ginen txertoaren eraginkortasun maila ezberdinetarako emaitza praktikoak aurreikusteko", dio Nisbet-ek, fabrikatzaile komertzial batek hartu aurretik lan gehiago behar dela gaineratuz.
Egungo txertoekin beste ikuspegi alternatiboak gibeleko txertoen (Fasciola hepatica) aurkako txerto prototipoak ebaluatzen dituzten saiakerek gaur egungo txertoekin planteamendu alternatiboak erabiltzeko ahalmena erakutsi dute, baita parasitoak immunitate-sistematik ihes egiten duenari buruzko informazio baliotsua ere. Aurreko lanek frogatu zuten sistema immunologikoa estimulatzen edo kentzen duten fluke proteina batzuek proteina bakarreko txerto gisa babesten zutela, baina proteina konbinatuen txertoek ez zuten. Ardi-sakaroaren (Psoroptes ovis) aurkako txerto batek babes-maila ona erakutsi zuen ardietan.
Hala ere, ganaduan, non bizkarroi berak sor dezakeen sarna psoroptikoa, ez zen itxaropentsua. Heste gastrointestinalaren beste bi txertoek, Ostertagia ostertagi eta Cooperia spp., "bertako" txerto batekin txertotutako abelburuetan Cooperia espezie ezberdinen arteko babes gurutzatua erakutsi zuten, eta erabilera komertzialerako beharrezkoa izango zen bertsio birkonbinatzaile batek ez zuen babesik eskaintzen. Antzeko egoera antzeman zen Ostertagia ostertagiren aurkako txerto prototipo batean, desberdintasun horien arrazoiak gehiago ikertu beharra adieraziz.
Erditze-sistema hobetuak Oilo gorriaren (Dermanyssus gallinae) aurkako txerto baterako entrega-sistema eraginkorragoa garatu zen, oiloetan erantzun immune iraunkor eta eraginkorrak sortuko zituena. "Ekoizleek ezin dute oiloak etxetik ateratzen jarraitu txertoa emateko. Gaztetan txertatu nahi dute eta immunitatea erruteen ziklo osoan irauten duela ziurtatu", dio Tom McNeillyk, Moredun-eko Gaixotasunen Kontroleko buruak. McNeilly-k dioenez, hiru adjuvante emateko sistema ezberdin probatu ziren txerto prototiporako, eta "irabazle argia" izan zen adjuvant berri batean oinarrituta. EBk finantzatutako SAPHIR proiektuaren antzera, antibiotikoen erabilera murrizteko abereen txertoak garatu zituena, Paragonek aurrerapen handiak egin ditu oinarrizko zientzian, besteak beste, txertoen erantzun immunearen ezaugarriak eta txertoen antigenoen erantzun immunologikoa suspertzeko moduak, parasitoen txertoetatik haratago erabilgarria dena.
Akademiako eta animalia-osasuneko industriako bazkideen arteko harreman estuari esker, ikerketaren ondoriozko berrikuntzak merkatura daitezkeen produktuen asmoekin bat egiten zuten. Bazkideek honako baldintza hauek bete zituzten prototipo bakoitzeko: xede-produktuaren profila, arauzko eta teknikoen arrakasta/berrikuspen teknikoaren txostenak eta tresna immunologikoak merkaturatzeko plan bat. Taldeak nazioarteko inkesta bat egin zuen txertoen diseinua gidatzeko eta bilerak egin zituen eragileekin txertoak ustiategietan nola erabil litezkeen eztabaidatzeko.
Aurrerapena bi proteinako txerto bati buruzko datu berriek, nematodoen ASPren babes-mekanismoei buruzko informazio gakoek eta F. hepatica hautagai baten epitopoen aitorpenari buruzko ikuspegiek adierazi zuten. Graduondoko prestakuntza zabalak iraunkortasun neurri sendoak bermatu zituen.
- MOREDUN RESEARCH INSTITUTE (MRI)
Lotutako proiektuak
