H2020 Paragone Proiektua: PARAGONE: Animalien parasitoen aurkako txertoak
- Mota Proiektua
- Egoera Bete
- Exekuzioa 2015 -2019
- Esleitutako Aurrekontua 8.998.559,75 €
- Eremua Europeo
- Finantza-iturri nagusia Horizonte 2020
- Proiektuaren webgunea Proyecto Paragone
Hausnarkarien eta hegaztien helminto eta ektoparasitoen infekzioek eragin handia dute elikagai-iturri garrantzitsu hauen eraginkortasun biologikoan. Parasitoen aurkako sendagaien erabilera bereizketarik gabeak erresistentzia sortu du mundu osoan. Parasitoen aurkako sendagaien eskasiaren alternatiba nagusia txertoak dira. PARAGONE proiektuak parasitoen txertoen garapenari buruzko aurreko EBk eta beste batzuek finantzatutako proiektuetako aurkikuntzak erabiliko ditu hainbat prototipo itxaropentsuren merkaturatzea aurrera eramateko. Europako, Txinako, Uruguaiko, ETEetako eta industria farmazeutikoko bazkideek zuzenean sustatuko dituzte prototipoak hausnarkarietan dauden helmintoen aurka (Fasciola hepatica, Cooperia spp., Ostertagia ostertagi, Teladorsagia circumcincta eta Haemonchus contortus), baita Psoroptes ovis (haurdunak) eta Dermanyssus gallinae (hegaztiak) akaro ektoparasitoen aurka ere.
Prototipo batzuen eraginkortasuna maximizatzeko laguntzaile edo administrazio-sistema berriak erabiliko dira. Horrez gain, immunologia-azterketek lehenago arazoak sortu dituzten patogenoetan zentratuko dira, askotan txertoek funtziona dezaten gainditu behar diren molekula immunosupresoreak askatzen dituztelako, edo txerto birkonbinatuek prototipo natiboekin ikusitako babesa lortu ez dutelako. Punta-puntako teknologiak erabiliko dira ostalariaren/parasitoaren arteko elkarrekintzak aztertzeko, immunitatea hobetuko duten administrazio-sistemetan erabil daitezkeen babes-sinadura gakoak definitzeko, eta beste ikerketa batzuek egungo txerto-hautagaien polimorfismoa definituko dute, eratorritako prototipoak eskala geografiko guztietan egokiak direla ziurtatzeko.
Horretarako gakoa da zientzialariek industria farmazeutikoarekin eta beste interesdun batzuekin (nekazariak, albaitariak, arautzaileak) duten konpromisoa hainbat dibulgazio-jarduera eginez, txertoak zelaian nola ezar daitezkeen ondoen jakiteko iritzia biltzeko erabiliko direnak. Emaitza gutxienez bi prototipo izango dira, industria farmazeutikoak, gobernuak edo erakunde filantropikoek onartzeko puntura iritsi direnak, eta aztertutako prototipo guztientzat merkaturatzeko bide argi bat.
Ikerketak goian aipatutako txertoak eta tresna immunologikoak garatzera eraman zuen. Jarduera hauek bazkide komertzialek zuzendutako erakustaldi-helburuek lagundu zituzten. Bazkide akademikoek beren aurkikuntzak argitaratzeko betebeharra bete zuten eta proiektuaren webgunea eguneratu zuten. Zientzialari hasiberriek laborategi arteko bisitetan eta tailerretan parte hartzeko aukera izan zuten (Hurrengo Belaunaldiko Sekuentziazioa, Tresna Immunologikoak, Albaitaritza Txertoenologia). Hainbat dibulgazio-jarduerari esker, proiektuak bere eragin-potentziala lortu zuen; Aurrez aurreko interesdunen sinposioek eta nazioarteko online inkesta batek parasitoen aurkako txertoen etorkizuneko aukerak agerian utzi zituzten.
Txertoak garapen-bideko hainbat etapatan hasi ziren; Aurreratuenetik gutxien aurreratura, T. circumcincta, O. ostertagi, C. oncophora, F. hepatica, P. ovis eta hegazti-akaro gorriaren aurkako txertoak ziren. Antigenoen konbinazioak probatzen zituzten entseguekin lotuta, erantzun babesleak sustatzeko diseinatutako txertoen formulazioei buruzko ikerketak egin ziren. Lan hau erantzun antiparasitario babesleen definizioarekin lotuta zegoen, txertoak populazio guztietan eraginkorrak izan daitezen diseinatu ahal izateko. O. ostertagi eta C. oncophora-rentzat, ikerketa eta analisi immunologikoek frogatu zuten antigenoen konformazioa funtsezkoa dela ASP antigenoak erabiliz babesa eragiteko. C. oncophora-ren ASP natibo batek behiak beste isolatu baten eta beste Cooperia spp.-ren aurka babes gurutzatua eragiten zuela frogatu zen. baina ez zituen ardiak C. curticei-ren aurka babestu. Ostertagia ASP birkonbinatu baten formulazioa, XStalbio eta MAMP SME adjuvante formulazio berritzailearekin, nahi den fenotipoarekiko erantzunak modulatu zituen, baina ez zuen babesik eragin. Ostertagiako ASP natiboarekin egindako landa-entsegu batek, luma-probetan immunitatea eragin zuenak, ez zuen belarraren aurkako babesik sortu. Ikerketa batek ASP birkonbinatu bat probatu zuen, ASP natibo babeslearen modu berean tiol-purifikatua, baina horrek ez zuen txerto babeslerik sortu.
T. circumcincta-rekin egindako lanak babesa eragiten duela frogatu den txerto birkonbinatu bat sinplifikatzea zuen helburu. Hemen, 8 antigeno arrakastaz adierazi ziren 3 sistemetan. Koadierazitako bertsioak ez zuen immunitatea eragin bildotsetan. XStalbioren MAMP-arekin batera emandako erantzunak hobetu zitezkeen aztertzeko probatu zen. Inkorporazioak antigenizitatea mantendu zuen baina ez zituen nahi ziren erantzunak hobetu. Kanariar arrazetan egindako luma-probetan, zizareen aurkako erresistentzia desberdina erakutsi zutenean, erakutsi zen 6 hilabeteko ardi "erresistenteetan" erresistentzia handitu zela txertoarekin. "Sentikorrak" diren arkumeetan, txertoak eragin negatiboa izan zuen zizareen garapenean. Antzeko efektua ikusi zen 3 hilabeteko "erresistente" diren ardietan. Eskualde ezberdinetako zizareen antigenoak kodetzen dituzten sekuentziek 7/8 proteinetan dibertsitate txikia erakutsi zuten. 2 proteinako prototipo batek 8 proteinako prototipoaren antzeko babesa eragin zuen.
2 proteina dituen txerto hau dosiaren eragina aztertu zuen ikerketa batean berriro probatu zen; Txertoa hartu zuten pertsonek kontrol-taldeek baino parasitologia-parametro baxuagoak izan bazituzten ere, desberdintasunak ez ziren esanguratsuak. 8 proteinako txertoari buruzko aurreko datuak erabiliz egindako modelizazio matematikoak erakutsi zuen aurretik lortutako eraginkortasun-mailek eragin handia izan zezaketela ondorengo kutsaduran, txertoa ardi eta bildotsei emanez gero. Aurretik frogatu da F. hepatica antigeno birkonbinatuek babes aldakorra ematen dutela; Bazkideek konbinazio hauek probatu zituzten babes koherentea sortuko ote zuten aztertzeko. Babes esanguratsua ikusi zen 4 antigeno + montanidoa erabiliz ardi-proba batean; Hau ezin zen errepikatu. 4 antigenoak erabiliz behiekin egindako bi saiakuntzak ez ziren arrakastatsuak izan. Eskualde ezberdinetako zizareen antigeno-sekuentziek dibertsitate txikia erakutsi zuten batean izan ezik guztietan. MAMPak XStalbio adjuvantearen formulazioan sartzea probatu zen administrazio bateratuaren bidez erantzunak hobetu zitezkeen aztertzeko. Antigenizitatea mantendu zen, batez ere MAMP-arekin. Erantzunak laguntzailearen menpekoak izan ziren, baina ez zen babesik lortu ardiak probatu zirenean. Beste antigeno batzuk probatu ziren, baina hauek ez zuten babesik eman ardietan.
Babesaren korrelazioei buruzko lanak IgG2-k zeregin bat erakutsi zuen. Epitopoen analisiak katepsina L-ren ezagupen selektiboa adierazi zuen babestutako behietan. Eskala handiko RNA analisiak agerian utzi zuen immunitate-saihesbideen bideak nabarmen aldatuta zeudela gripearen infekzioan, eta ardi-ustiategiko saiakuntza batek immunomodulazioa erakutsi zuen infekzioaren hasierako faseetan. Immunomodulazio emaitza hauek orain erabiliko dira F. hepatica txertoaren garapen gehiagorako. P. ovis-en behi-prototipo batean egindako lanak lehenago ardiak babesten zituzten birkonbinatzaileekin egindako saiakuntza bat barne hartu zuen. Hasieran lesioen tamainan aldeak ikusi baziren ere, oro har ez zen desberdintasun esanguratsurik ikusi.
RNAren ikerketek immunitate-mekanismoak informatu zituzten. Antigenoak emateko sistemak (montanidoak, DNA eta Eimeria transgenikoa) alderatu ziren hegazti akaro gorriaren aurkako katepsina txerto bat lortzeko. DNAk eta Eimeriak antigorputz-erantzun hutsalak erakutsi zituzten, baina antigeno+montanido konbinazioak erantzun luzeak sortu zituen. Oiloak katepsina+montanidarekin txertatu ziren eta txertatutako hegaztien odolaz elikatzen ziren akaroetan efektua ikusi zen. PARAGONE-k oso beharrezkoak ziren ardi zitokinen matrizeak sortu zituen. Txerto bakoitzaren produktuen profilekin eta berrikuspen teknikoekin batera, tresna horien merkaturatze plan bat garatu zen Immunotools ETEarekin lankidetzan.
EBk finantzatutako Horizon 2020 PARAGONE proiektuak abeltzaintzako patogeno garrantzitsuak diren parasito multizelularrei ekin zien. Hauek nabarmen eragiten dute hausnarkarien eta hegazti-ekoizpenean, batez ere sistema intentsiboetan.
Gaur egun, kontrola antiparasitario eraginkorren kopurua murriztearen mende dago, eta parasitoen arteko erresistentzia farmakologikoak mehatxu bat dakar kontrol iraunkorrarentzat. PARAGONEk tresnak (txertoak eta immunitate-monitorizazio baliabideak) eta ezagutza sortu zituen epe luzeko kontrolerako irtenbideak emateko. Proiektuak hainbat zientzialari hasiberri ere trebatu zituen, proiektua amaitutakoan mundu mailako komunitate zientifikoa kontrolatzen zailak diren patogeno hauei aurre egiteko prestatuta egon dadin beharrezkoak diren diziplina arteko ikuspegietan adituak.
Akademiako kideek animalien osasunaren industriako bazkideekin harremanak sendotu zituzten, mundu mailako eraginagatik hautatutako parasitoen aurkako txertoak garatzeko programak ezartzeko: Fasciola hepatica, Ostertagia ostertagi, Cooperia oncophora, Teladorsagia circumcincta, Psoroptes ovis eta Dermanyssus gallinae. Organismo konplexu hauen aurkako txerto eraginkorrak garatzea erronka handia da.
Proiektuak aurrerapen handiak egin zituen helburu horretara bidean, parasitoen biologiari eta ostalariaren eta parasitoaren arteko elkarrekintzei buruzko ezagutza lortuz eta aprobetxatuz. Txerto hautagai nagusiak/berriak probatu ziren, erantzunaren aldakortasuna jorratzeko ikerketekin batera, etorkizuneko ikerketek lagunduko duten babes-faktoreei buruzko informazio gakoa emanez. Lorpen horiek prestakuntza, dibulgazio eta komunikazio jarduera sendoek lagundu dituzte.
Hausnarkarien eta hegaztien helminto eta ektoparasito infekzioek eragin handia dute elikagai-iturri garrantzitsu hauen eraginkortasun biologikoan. Parasitoen aurkako erabilera bereizketarik gabeak erresistentzia eragin du mundu osoan.
Parasitoen aurkako sendagaien hornidura gutxitzearen alternatiba nagusia txertoak dira. Kasu honetan, PARAGONE proiektuak parasitoen aurkako txertoen garapenari buruzko aurreko EBk finantzatutako eta beste proiektu batzuen emaitzak baliatuko ditu hainbat prototipo itxaropentsu merkaturatzeko bidean jartzeko. Europako, Txinako, Uruguaiko, ETEetako eta farmazia-enpresetako bazkideek prototipoak garatuko dituzte zuzenean Fasciola hepatica, Cooperia spp., Ostertagia ostertagi, Teladorsagia circumcincta eta Haemonchus contortus hausnarkarien eta Psoroptes ovis (haurdunak) eta Dermanyssus gallinae (hegaztiak) akaro ektoparasitoen aurka. Prototipo batzuen eraginkortasuna maximizatzeko laguntzaile edo administrazio-sistema berriak erabiliko dituzte.
Horrez gain, immunologia-azterketek lehenago arazoak sortu dituzten patogenoetan zentratuko dira, askotan txertoak funtziona dezaten gainditu behar diren molekula immunosupresoreak askatzen dituztelako, edo txerto birkonbinatuek prototipo natiboekin ikusitako babesa lortu ez dutelako. Punta-puntako teknologiak erabiliko dira ostalariaren/parasitoaren arteko elkarrekintzak aztertzeko, immunitatea hobetuko duten administrazio-sistemetan erabil daitezkeen babes-sinadura gakoak definitzeko, eta beste ikerketa batzuek egungo txerto-hautagaien polimorfismoa definituko dute, eratorritako prototipoak eskala geografiko guztietan egokiak direla ziurtatzeko.
Ezinbestekoa da zientzialariak farmazia-enpresekin eta beste interes-talde batzuekin (nekazariak, albaitariak, arautzaileak) harremanetan jartzea hainbat dibulgazio-jarduera eginez, txertoak zelaian nola ezar daitezkeen ondoen jakiteko iritzia biltzeko erabiliko direnak. Emaitza gutxienez bi prototipo izango dira, farmazia-, gobernu- edo filantropia-agentziek hartzeko prest, eta aztertutako prototipo guztien merkaturatzeko bide argi bat.
Mundu osoan abeltzaintzako parasitoek erresistentzia garatzen duten heinean, EBk finantzatutako zientzialariak txerto berrietan lanean ari dira eta ekonomikoki garrantzitsuak diren parasitoen aurkako txertoen administrazio sistemak hobetzen. Txertoak gaixotasunak kontrolatzeko sendagaien alternatiba seguruagoa eta ingurumenarentzat errespetutsuagoa dira, ez baitute hondakinik uzten edo erresistentzia parasitarioa sortzen. Hala ere, parasito zelulanitzak organismo konplexuak dira birusekin eta bakterioekin alderatuta, beraz, haien aurkako txertoak garatzea ez da erraza. «Parasitoak milioika urtez eboluzionatu dute beren ostalariekin batera, eta trikimailu mota guztiak erabili dituzte beste animalien barruan edo gainean bizitzeko, sistema immunitarioak detektatu gabe, eta horrek zaildu egiten ditu detektatzea», dio Al Nisbetek, EBk finantzatutako Paragone proiektuko zientzialari nagusiak eta Erresuma Batuko Moredun Ikerketa Institutuko txertoen buruak (proiektua koordinatu zuen erakundea).
Paragone taldeak abeltzaintzako parasito ohikoenen, besteak beste, ardiak, behiak eta hegaztiak, aurkako etorkizun handiko sei txerto prototiporekin lan egin zuen. Ardi-zizarearen txertoa sinplifikatzea Taldeak aurrera egin zuen ardietan urdaileko zizare marroiaren (Teladorsagia circumcincta) aurkako txerto batekin, zortzi osagai ezberdin zituen prototipo txerto batekin hasita. «Sei proteina birkonbinatu bakterioetan eta bi legamian ekoitzi ziren, eta gero elkarrekin formulatu ziren txertoa sortzeko; beraz, prototipo eraginkorra izan arren, bere ekoizpen komertziala konplexua eta garestia izan zen», dio Nisbetek. Parasitoaren aurkako babeserako proteina garrantzitsuenak identifikatu ziren. «Proiektuaren amaieran, bi osagai besterik ez zituen txerto bat probatu eta txertoaren eraginkortasun-maila desberdinen emaitza praktikoak aurreikusteko eredu matematiko bat sortu ahal izan genuen», dio Nisbetek, eta gaineratzen du lan gehiago behar dela fabrikatzaile komertzial batek hartu aurretik.
Gaur egungo txertoekin bestelako ikuspegiak Fasciola hepatica gibeleko txertoen aurkako prototipoen ebaluazio-entseguek egungo txertoekin bestelako ikuspegiak erabiltzeko aukera erakutsi dute, eta informazio baliotsua eman dute parasitoak sistema immunologikoa nola saihesten duen jakiteko. Aurreko lanek erakutsi zuten sistema immunologikoa estimulatzen edo kentzen duten zenbait proteinak proteina bakarreko txerto gisa babesa ematen zutela, baina proteina konbinatuko txertoek ez. Ardi-kakarraren akaroaren (Psoroptes ovis) aurkako txerto batek babes-maila ona erakutsi zuen ardietan.
Hala ere, behietan, non parasito berak sarna psoroptikoa eragin dezakeen, ez zen itxaropentsua izan. Beste bi txerto gastrointestinalek, Ostertagia ostertagi eta Cooperia spp.-ek, babes gurutzatu maila altua erakutsi zuten Cooperia espezie desberdinen artean "bertako" txerto batekin txertatutako behietan, eta bertsio birkonbinatu batek, erabilera komertzialerako beharrezkoa izango zenak, ez zuen babesik eskaini. Antzeko egoera ikusi zen Ostertagia ostertagi-ren aurkako prototipo txerto batean, eta horrek adierazten du desberdintasun horien arrazoiak ikertzeko beharra.
Hobetutako administrazio-sistemak Dermanyssus gallinae akaro gorriaren aurkako txerto bat emateko sistema eraginkorragoa garatu zen, oiloetan erantzun immune iraunkorrak eta eraginkorrak sortuko zituena. «Ekoizleek ezin dituzte oiloak etxetik ateratzen txertoa jartzeko. Adin txikian txertoa eman nahi diete eta immunitatea errunaldi-ziklo osoan irautea ziurtatu», dio Tom McNeillyk, Moreduneko Gaixotasunen Kontrolerako buruak. Hiru adjuvante emateko sistema desberdin probatu ziren prototipoko txertoarentzat, eta emaitza "irabazle argia" izan zen adjuvante berri batean oinarrituta, McNeilly-k dioenez. EBk finantzatutako SAPHIR proiektuaren antzera, zeinak abeltzaintzako txertoak garatu zituen antibiotikoen erabilera murrizteko, Paragonek aurrerapen handiak egin ditu oinarrizko zientzian, besteak beste, txertoen aurkako erantzun immunologikoa karakterizatzea eta txertoen antigenoen aurkako erantzun immunologikoak estimulatzeko moduak, eta hori parasitoen txertoez haragoko erabilgarria da.
Akademiako eta animalien osasuneko industriako bazkideen arteko harreman estuak bermatu zuen ikerketatik sortutako berrikuntzak merkaturatzeko produktuen asmoekin bat zetozela. Bazkideek prototipo bakoitzerako honako eskakizun hauek bete zituzten: helburuko produktuaren profila, araudi eta arrakasta teknikoaren probabilitatea/berrikuspen teknikoaren txostenak, eta tresna immunologikoen merkaturatze plan bat. Taldeak nazioarteko inkesta bat egin zuen txertoen diseinua gidatzeko eta bilerak egin zituen interesdunekin txertoak nola erabil zitezkeen ustiategietan eztabaidatzeko.
Aurrerapenaren adibide izan ziren bi proteinako txerto bati buruzko datu berriek, nematodoen ASPen babes-mekanismoei buruzko ikuspegi gakoek eta F. hepatica hautagai baten epitopoen ezagutzari buruzko ikuspegiek. Graduondoko prestakuntza zabalak iraunkortasun neurri sendoak bermatu zituen.
- MOREDUN RESEARCH INSTITUTE (MRI)
Lotutako proiektuak
